凱氏定氮儀是利用凱氏定氮法對(duì)物質(zhì)中蛋白質(zhì)含量進(jìn)行測(cè)定的專(zhuān)用儀器。凱氏定氮儀按其配置分，可以分為全自動(dòng)凱氏定氮儀和半自動(dòng)定氮儀。其中全自動(dòng)凱氏定氮儀包括消化爐和凱氏蒸餾裝置。凱氏定氮儀操作時(shí)可以分為人工模式和自動(dòng)模式，不同的實(shí)驗(yàn)者，可以根據(jù)對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的熟練程度，自由選擇哪種方式。一般的，新手我們推薦使用自動(dòng)模式，可以為你省去很多的步驟。目前，凱氏定氮儀已經(jīng)廣泛使用于測(cè)定乳核乳制品中蛋白質(zhì)的測(cè)定。
下面我們主要介紹下，我們?cè)谑褂?/span>全自動(dòng)凱氏定氮儀測(cè)定蛋白質(zhì)含量時(shí)，如何清洗定氮儀。
儀器安裝前，凱氏定氮儀各部件需經(jīng)一般方法洗滌干凈，所用橡皮管、塞須浸在10%NaOH溶液中，煮約10min，水洗、水煮10min，再水洗數(shù)次，然后安裝并固定在一只鐵架臺(tái)上。
儀器使用前，微量全部管道都須經(jīng)水蒸氣洗滌，以除去管道內(nèi)可能殘留的氨，正在使用的儀器，每次測(cè)樣前，蒸氣洗滌5min即可。較長(zhǎng)時(shí)間未使用的儀器，重復(fù)蒸氣洗滌，不得少于三次，并檢查儀器是否正常。仔細(xì)檢查各個(gè)連接處，保證不漏氣。這樣，一方面保證了儀器的清潔，另一方面，也同時(shí)對(duì)儀器進(jìn)行了檢查，一些壞的零部件，可以及時(shí)被查出并替換。
儀器安裝完后，我們需具體對(duì)儀器的內(nèi)部進(jìn)行清潔。首先在凱氏定氮儀蒸氣發(fā)生器中加約2/3體積蒸餾水，加入數(shù)滴硫酸使其保持酸性，以避免水中的氨被蒸出而影響結(jié)果，并放入少許沸石（或毛細(xì)管等），以防爆沸。這個(gè)步驟有點(diǎn)類(lèi)似于凱氏定氮法的消化前步驟，用相應(yīng)的試劑對(duì)其進(jìn)行清洗。沿小玻杯壁加入蒸餾水約20mL讓水經(jīng)插管流入反應(yīng)室，但玻杯內(nèi)的水不要放光，塞上棒狀玻塞，保持水封，防止漏氣。這一步可直接驗(yàn)證插管是否可以使用。蒸氣發(fā)生后，立即關(guān)閉廢液排放管上的開(kāi)關(guān)，使蒸氣只能進(jìn)入反應(yīng)室，導(dǎo)致反應(yīng)室內(nèi)的水迅速沸騰，蒸出蒸氣由反應(yīng)室上端口通過(guò)定氮球進(jìn)入冷凝管冷卻，在冷凝管下端放置一個(gè)錐形瓶接收冷凝水。從定氮球發(fā)燙開(kāi)始計(jì)時(shí)，連續(xù)蒸煮5min，然后移開(kāi)煤氣燈。沖洗完畢，夾緊蒸氣發(fā)生器與收集器之間的連接橡膠管，由于氣體冷卻壓力降低，反應(yīng)室內(nèi)廢液自動(dòng)抽到反應(yīng)室外殼中，打開(kāi)廢液排出口夾子放出廢液。整個(gè)清洗過(guò)程，到這里就結(jié)束了，經(jīng)過(guò)清洗這個(gè)過(guò)程，儀器內(nèi)部環(huán)境已經(jīng)符合我們測(cè)定蛋白質(zhì)含量的需求，另外，儀器的各部件也得到了檢驗(yàn)，可以及時(shí)更換漏氣或者其他壞了的部分。根據(jù)以上步驟重復(fù)清洗2～3次，再在冷凝管下?lián)Q放一個(gè)盛有硼酸-指示劑混合液的錐形瓶使冷凝管下口完全浸沒(méi)在溶液中，蒸餾1～2min，觀察錐形瓶?jī)?nèi)的溶液是否變色。如不變色，表示蒸餾裝置內(nèi)部已洗干凈。移去錐形瓶，再蒸餾1～2min，用蒸餾水沖洗冷凝器下口，關(guān)閉煤氣燈，儀器即可供測(cè)樣品使用。
這樣，凱氏定氮儀整個(gè)清洗過(guò)程就結(jié)束了。凱氏定氮儀在測(cè)定蛋白質(zhì)含量前，一般都需要經(jīng)過(guò)清洗，這樣對(duì)于測(cè)定結(jié)果，會(huì)更加精確。另外，也可以保證實(shí)驗(yàn)室人員的安全，因?yàn)樵谇逑催^(guò)程中，對(duì)儀器進(jìn)行了檢查，排除了因?yàn)閮x器的故障而造成了危險(xiǎn)。
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